Что такое гистологический анализ?

Гистология - это исследование тканей и органов путем создания срезов, окрашивания и изучения этих срезов под микроскопом. Гистология позволяет визуализировать структуру ткани и характерные изменения, которые могут произойти в ней. Гистология широко используется в медицинской диагностике, научных исследованиях и судебно-медицинской экспертизе. После того, как образец ткани подвергся фиксации, обработке, заливке, разрезанию и окрашиванию, он анализируется с помощью микроскопии, а результаты интерпретируются патологоанатомом.

Что означает гистологический анализ? Главная задача такого исследования - диагностика различных патологических состояний, помощь в прогнозе и выборе лечения. Часто гистологический анализ является последним этапом диагностики и позволяет поставить окончательный диагноз и определить тактику лечения. Анализ на гистологию чаще всего назначается для определения того, какую природу имеет новообразование - злокачественную или доброкачественную. Кроме того, гистологический анализ используют для диагностики и мониторинга эффективности лечения воспалительных заболеваний (особенно в гастроэнтерологии и гинекологии), эндокринных нарушений и аутоиммунных заболеваний.

Как берут анализ на гистологию? Это делают с помощью биопсии — медицинской процедуры, при которой берется небольшой образец ткани для исследования под микроскопом. Образец ткани можно взять практически из любого места или в организме, включая кожу, желудок, почки, печень легкие, мышцы и прочее. Типы биопсии включают в себя:

  • Соскоб клеток - удаление клеток с поверхностного слоя ткани, например, внутри шейки матки.
  • Игольчатая биопсия – специальная полая игла, управляемая с помощью ультразвука или компьютерной томографии, используется для получения ткани из органа или из подкожной ткани.
  • Эндоскопическая биопсия – когда эндоскоп (трубка с камерой на конце) используется для удаления ткани, например, из желудка во время эндоскопии (диагностическая процедура, позволяющая заглянуть внутрь верхних отделов желудочно-кишечного тракта).
  • Эксцизионная биопсия – при хирургическом вмешательстве удаляется большой кусок ткани.
  • Тонкоигольная аспирация – использование иглы и шприца для получения образца клеток, например, из щитовидной железы или опухоли молочной железы.

Гистологический анализ предполагает использование специальных методов окрашивания. Гистопатологическая лаборатория получает три основных типа образцов:

  • Образцы ткани, удаленные в результате биопсии.
  • Более крупные образцы ткани, иногда целый органы или их части, которые удаляют во время хирургических операций. Примеры: матка после гистерэктомии, толстая кишка после колэктомии или миндалины после тонзиллэктомии.
  • Жидкость и очень маленькие кусочки ткани (отдельные клетки, а не группы клеток, например, внутри жидкости вокруг легкого).

Подготовка ткани

Когда эти органы/ткани/жидкости поступают в лабораторию патологии, их сначала помещают в формалин, чтобы предотвратить их разрушение (так называемая фиксация). Затем их должен осмотреть патологоанатом, который опишет любые аномалии в ткани, а затем тщательно препарирует ее и помещает на предметные стекла для микроскопического исследования. Если рутинная обработка и микроскопическое исследование не дают окончательного ответа на поставленный диагностический вопрос, применяются специальные методы, такие как:

  • Окрашивание
  • Иммуногистохимия
  • Электронная микроскопия
  • Проточная цитометрия
  • Цитогенетическое исследование

Окрашивание

Гистопатологи используют химические свойства компонентов изучаемых тканей при выборе различных красителей. Красители наносятся на тонкие срезы предметных стекол, чтобы специалист мог увидеть клетки под микроскопом. Наиболее широко используемыми красителями являются гематоксилин и эозин. Это окрашивание представляет собой комбинацию основного красителя (гематоксилин) и кислотного красителя (эозин), которые реагируют с кислыми и основными компонентами клеток на предметном стекле, придавая тканям фиолетовый и розовый цвета. Другие имеющиеся красители выделяют жиры, различные тканевые волокна, различные типы слизи, микроорганизмы, белки и т. д.

Иммуногистохимия

Основным изменением в гистопатологии в последнее время стало развитие иммуногистохимии. В то время как специальные окраски являются относительно грубым и, в большинстве случаев, неспецифическим способом окрашивания компонентов ткани, иммуногистохимические окраски по сравнению с ними гораздо более специфичны. Этот метод включает в себя присоединение красителя к антителу, которое будет связываться только с определенным типом белка на клетке или внутри нее. Антитела подобны ключам, которые могут открыть только определенный замок (клеточный белок или антиген). Доступны сотни антител, которые позволяют маркировать сотни или даже тысячи различных типов белков. Там, где специальное окрашивание может позволить патологоанатому идентифицировать, например, клетку как раковую, иммуногистохимия может определить, из какого органа в организме произошла эта раковая клетка и насколько агрессивно она может себя вести. Некоторые лаборатории могут использовать антитела с флуоресцентной меткой для проведения компьютерного анализа препаратов, что сокращает время, затрачиваемое на исследование большого количества препаратов, и определяет, какие препараты должны быть проверены патологоанатомом, а какие находятся в пределах нормы.

Электронная микроскопия

Обычные микроскопы, которыми пользуются патологоанатомы, недостаточно мощны, чтобы увидеть мельчайшие части, из которых состоит клетка. Обычно это не проблема, но некоторые заболевания можно диагностировать только на этом субклеточном уровне. Примеры включают заболевания почек (гломерулонефрит) или агрессивные виды рака, которые теряют свои нормальные белки, что делает иммуногистохимию малоинформативной для их идентификации. В этих случаях используется очень мощный электронный микроскоп. Он может увеличивать до 2 миллионов раз, тогда как максимальная сила обычного светового микроскопа составляет всего 1-2 тысячи раз.

Проточная цитометрия

Этот метод чаще всего используется в качестве дополнения к диагностике рака клеток крови (лейкемии и миеломы). Клетки подвешивают в жидкости и пропускают через лазерный луч. Детектор измеряет, как рассеивается луч и испускается ли флуоресцентный свет возбужденными частицами на клетках. Это интерпретируется компьютером как количество клеток/частиц/белков (независимо от исследуемого вещества), показанных на графике. Это можно использовать для определения количества и относительных пропорций различных типов клеток в крови и выявления любых аномальных клеток.

Цитология

Это изучение отдельных клеток биопсийного образца. Патологоанатом исследует под микроскопом количество клеток, их типы, форма, размер, ядро и как они сгруппированы вместе. Цитология чаще всего используется в качестве инструмента скрининга. Примером может быть скрининг опухоли молочной железы. Подозрительно выглядящие клетки молочной железы - повод для выполнения пункционной биопсии с помощью иглы большего размера.

Цитогенетическое исследование

Как известно, немалую роль в развитии онкологических заболеваний играет генетический фактор. Цитогенетика — это общий термин для анализа генетического материала (хромосомы и их ДНК) клеток, который становится все более востребованным компонентом исследования патологии исследуемой ткани. Используемые методы включают окрашивание хромосом для выявления областей, где гены могли быть удалены, продублированы или повреждены. Флуоресцентные метки также могут быть прикреплены к определенным последовательностям ДНК (частям определенных генов), что позволяет увидеть дефектные гены при исследовании клеток под специальным микроскопом.

В современных гистологических лабораториях большинство этих этапов автоматизированы.

Для чего используется исследование?

Что показывает анализ гистологии? Гистологическое окрашивание и исследование имеют очень большое клиническое значение в медицинской диагностике и лечении практически во всех областях медицины. Это золотой стандарт диагностики многих патологических заболеваний, для которых окраска является обязательным компонентом. Гистохимический анализ образца ткани позволяет патологоанатому не только поставить диагноз, но и определить тяжесть заболевания и дать прогноз.

Биопсия и гистологический анализ используется для диагностики:

  • онкологических заболеваний
  • пептических язв, поражающих пищеварительную систему
  • гепатита – воспаления печени
  • болезни почек
  • эндометриоза
  • специфических инфекций
  • аутоиммунных заболеваний
  • эндокринных заболеваний

Гистологический анализ используется для мониторинга эффективности проводимой терапии, для принятия решения о выборе лечения (в частности, нужно ли оперативное вмешательство или нет), для определения характера предстоящей операции.

Когда назначается исследование?

Биопсию и гистологический анализ можно использовать для выяснения причины симптомов у человека или для диагностики ряда различных заболеваний. Если состояние уже было диагностировано, можно использовать анализ, чтобы определить, насколько оно серьезное или на какой стадии оно находится.

Гистология кожных и подкожных новообразований назначается при следующих симптомах:

  • сыпь в течение долгого времени не проходящая;
  • грубая кожа;
  • незаживающие кожные язвы;
  • родинка, которая меняет форму, размер или цвет;
  • родинка или новообразование с одним из следующих характерных признаков: асимметричная форма, зубчатые края, неравномерный цвет, большой диаметр, быстрая эволюция (родинка или нарост изменились за последние несколько недель или месяцев);
  • пузыри на коже.

Гистология костной и хрящевой ткани назначается при обнаружении тревожных признаков при сканировании изображений, таких как рентген или компьютерная томография.

Гистология матки и придатков назначается при обнаружении новообразований неясного происхождения и типа, при эндометриозе и/или дисплазии, кистах яичников, гиперплазии эндометрия, а также сопутствующих жалоб пациентки на боль в области таза, нерегулярные менструации в пременопаузе, кровотечения, трудности с мочеиспусканием.

В гастроэнтерологии показанием для биопсии и гистологического анализа будут являться полипы, дивертикулы, эрозии и язвы.

Что означает результат гистологического анализа?

Гистопатологические отчеты выполняются специалистом лабораторной медицины, но окончательно интерпретируются лечащим врачом. Отчеты могут включать описание внешнего вида гистологического образца ткани, описание ее строения, описание клеточных изменений, указание о наличии воспалительного процесса, предварительный диагноз.

В микроскопическом описании патологоанатом описывает, как клетки образца ткани выглядят под микроскопом. Конкретные признаки, которые специалист может искать и описывать, могут включать клеточную структуру, края опухоли, сосудистую инвазию, глубину инвазии и патологическую стадию.

Структура клетки: с помощью микроскопа патологоанатом исследует структуру клетки и микроскопические признаки образца ткани и присваивает опухоли гистологический класс. Гистологическая оценка помогает патологу определить тип опухоли.

  • Степень 1 или хорошо дифференцированная: клетки выглядят нормальными и не растут быстро.
  • Степень 2 или умеренно дифференцированная: клетки немного отличаются от нормальных.
  • Степень 3 или низкодифференцированная: клетки выглядят аномальными и имеют тенденцию к более агрессивному росту и распространению.

Края опухоли: если раковые клетки присутствуют по краям ткани образца, то края описываются как «положительные» или «вовлеченные». Если раковые клетки отсутствуют по краям ткани, то края описываются как «чистые», «отрицательные» или «не вовлеченные».

Сосудистая инвазия: патологоанатомы также описывают, присутствуют ли в опухоли кровеносные сосуды.

Специальные тесты или маркеры: в зависимости от образца ткани патологоанатом может провести тесты, чтобы дополнительно определить, присутствуют ли определенные белки или гены, а также насколько быстро растут клетки.

Результат гистологии обычно готов в течение 2-3 дней после биопсии. Получение результата, требующего более сложного анализа, может занять от 7 до 10 дней. Гистологический отчет является важным компонентом диагностического процесса. Лечащий врач будет использовать этот отчет в сочетании с другими результатами анализов и обследований, чтобы поставить окончательный диагноз и разработать стратегию лечения.

13316 просмотров