Общая информация об исследовании

Аутоиммунные заболевания соединительной ткани (ЗСТ) представляют собой гетерогенную группу хронических воспалительных заболеваний, характеризующихся нарушением регуляции иммунной системы, что приводит к выработке аутоантител и повреждению соединительных тканей. Эти заболевания в первую очередь поражают богатые коллагеном ткани, включая кожу, суставы, мышцы и внутренние органы. Распространенные аутоиммунные ЗСТ включают системную красную волчанку (СКВ), системный склероз (ССД), полимиозит, дерматомиозит, синдром Шегрена и смешанное заболевание соединительной ткани (СЗСТ). Патогенез ЗСТ включает сложное взаимодействие между генетической предрасположенностью, факторами окружающей среды и аномалиями иммунной системы, при этом гиперактивность В-клеток и выработка аутоантител являются отличительными чертами. Эти аутоантитела нацелены на ядерные и цитоплазматические компоненты клеток, вызывая воспаление, повреждение тканей и дисфункцию органов.

Клинические проявления аутоиммунных заболеваний соединительной ткани сильно варьируются и могут включать кожную сыпь, боли в суставах, мышечную слабость, сухость во рту, феномен Рейно и поражение внутренних органов. Диагностика часто требует сочетания клинической оценки, серологического тестирования и визуализационных исследований. Раннее выявление и точная диагностика необходимы для начала надлежащего лечения и предотвращения прогрессирования заболевания и осложнений.

АНФ (антинуклеарный фактор) анализ крови что это? Антинуклеарные антитела (АНА) представляют собой разнообразную группу аутоантител, которые нацелены на ядерные антигены, включая ДНК, РНК, гистоны, нуклеопротеины и различные ядерные ферменты. АНА являются наиболее широко используемыми серологическими маркерами в диагностике аутоиммунных ЗСТ. Они вырабатываются В-лимфоцитами как часть аберрантного иммунного ответа, что приводит к образованию иммунных комплексов и последующему воспалению тканей.

Наличие АНА является отличительной чертой аутоиммунных заболеваний, в частности системной красной волчанки (СКВ), при которой почти у всех пациентов наблюдается позитивность по АНА. Однако эти антитела также могут быть обнаружены при других ЗСТ, таких как системная склеродермия, синдром Шегрена. Низкие титры могут быть обнаружены у здоровых людей или у людей с неаутоиммунными заболеваниями, что делает необходимой тщательную интерпретацию.

Анализ АНФ HEp-2 (антинуклеарный фактор) что это такое? Это исследование является высокочувствительным методом обнаружения ANA с использованием непрямой иммунофлуоресценции на клетках эпителия человека типа 2 (Hep-2). Клетки Hep-2 служат идеальным субстратом из-за их больших ядер и обильных ядерных антигенов, что обеспечивает полный спектр ядерных компонентов для обнаружения антител.

Во время теста сыворотка пациента инкубируется с фиксированными клетками Hep-2, что позволяет любым присутствующим АНА связываться с ядерными антигенами. После промывки наносятся флуоресцентно меченые вторичные антитела, а образец исследуется под флуоресцентным микроскопом. Сообщается интенсивность флуоресценции (паттерны свечения) и картина ядерного окрашивания, а также титр АНА, который указывает на разбавление, при котором флуоресценция остается обнаруживаемой.

Флуоресцентные паттерны видны под микроскопом и помогают врачу поставить диагноз. Существуют различные типы паттернов свечения, каждый из которых может указывать на определённое аутоиммунное заболевание. Эти паттерны могут быть различны по интенсивности, расположению и форме свечения.

Основные типы паттернов свечения:

  • Ядерный паттерн (тканевой, или нуклеарный): Это один из самых распространённых паттернов. Он может быть различным по форме и интенсивности свечения. В зависимости от структуры свечения различают несколько подтипов:
    • Центромерный: флуоресценция локализуется в области центромер хромосом, что характерно для системной красной волчанки (СКВ) и других аутоиммунных заболеваний.
    • Гомогенный: свечение по всему ядру клетки равномерное, что также может быть связано с СКВ.
    • Петлеобразный (или кольцевой): флуоресценция в виде концентрических колец или петель, что также часто наблюдается при волчанке.
    • Пятнистый: появление ярких пятен на ядерной оболочке или внутри ядра, что может быть связано с хроническими заболеваниями, например, с синдромом Шегрена или Рейно.
  • Цитоплазматический паттерн: здесь флуоресценция происходит в цитоплазме клетки. Это может быть связано с определёнными аутоиммунными заболеваниями, такими как склеродермия, когда антитела нацелены на антигены в цитоплазме клеток.
  • Митотический паттерн: свечение появляется в митозах, то есть в процессе деления клеток. Это типичный паттерн для антицентромерных антител, который может наблюдаться при склеродермии.
  • Мембранный паттерн: свечение наблюдается в области клеточной мембраны. Этот паттерн может указывать на наличие антител против клеточных мембран, что характерно для различных заболеваний, включая воспалительные болезни соединительных тканей.
  • Антитела против ДНК (Anti-DNA): такой паттерн может наблюдаться при высоких уровнях антител к ДНК, что часто ассоциируется с системной красной волчанкой.

Метод Hep-2 АНФ остается золотым стандартом для тестирования антинуклеарных антител из-за его высокой чувствительности и способности определять различные картины ядерного окрашивания. Однако он требует квалифицированной интерпретации и может быть дополнен более специфическими иммуноанализами для обнаружения отдельных аутоантител, таких как анти-dsDNA, анти-SSA, анти-SSB и анти-Scl-70.

Показания к назначению исследования

  • Диагностика аутоиммунных заболеваний соединительной ткани: СКВ, системный склероз, синдром Шегрена, полимиозит и дерматомиозит.
  • Мониторинг активности заболевания и ответа на лечение, особенно при СКВ и системном склерозе.
  • Дифференциальная диагностика аутоиммунных заболеваний: для отличия ЗСТ от других воспалительных или инфекционных состояний.
  • Скрининг пациентов с клиническим подозрением на аутоиммунные заболевания: усталость, необъяснимая лихорадка, сыпь, артрит или феномен Рейно.
  • Оценка перекрестных синдромов: смешанное заболевание соединительной ткани (СЗСТ).

Подготовка к исследованию

Специальной подготовки к анализу антинуклеарный фактор не требуется.

Норма

Отрицательный результат анализа на антинуклеарный фактор обычно считается нормальным, при этом не наблюдается обнаруживаемой флуоресценции при стандартном разведении для скрининга. Титры ниже специфического для лаборатории порогового значения обычно считаются незначительными. Положительный результат с низким титром может наблюдаться у здоровых, особенно у пожилых людей.

Что означают отклонения от нормы?

Положительный результат ANA с высоким титром (>1:160):

  • Системная красная волчанка (СКВ): распространены гомогенные или пятнистые узоры, часто сопровождаемые антителами к dsDNA и анти-Sm.
  • Системный склероз: ядрышковые или центромерные узоры, часто связанные с антителами к Scl-70 и антицентромерным антителам.
  • Синдром Шегрена: пятнистые узоры, обычно связанные с антителами к SSA и анти-SSB.
  • Смешанное заболевание соединительной ткани (СЗСТ): крапчатые узоры, часто сопровождающиеся антителами к U1-RNP.
  • Полимиозит/дерматомиозит: крапчатые или ядрышковые узоры, связанные с антителами к Jo-1 и другими специфическими для миозита антителами.

Положительные ANA с низким титром (<1:160):

  • Может встречаться у здоровых людей, особенно у пожилых.
  • Транзиторная ANA-положительность при вирусных инфекциях или лекарственной волчанке.
  • Неспецифическая иммунная активация без клинической значимости.

Отрицательная ANA:

  • Исключает большинство аутоиммунных ЗСТ, хотя некоторые заболевания (например, синдром Шегрена с положительным результатом на анти-SSA, ограниченный кожный системный склероз) могут проявляться отрицательными результатами ANA
  • Предлагает альтернативные диагнозы у пациентов с неспецифическими симптомами.

Что может исказить результат?

  • Лекарственные препараты: гидралазин, прокаинамид, изониазид и другие препараты могут вызывать АНА-позитивность (лекарственная волчанка).
  • Вирусные инфекции (например, вирус Эпштейна-Барр, гепатит С) могут вызывать транзиторную АНА-позитивность.
  • АНА-позитивность увеличивается с возрастом, особенно у лиц старше 60 лет.
  • Хронические воспалительные или неопластические заболевания могут давать ложноположительные результаты.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Tebo AE. Recent approaches to optimize laboratory assessment of antinuclear antibodies. Clin Vaccine Immunol. 2017;24(12):e00270-17.

International Consensus on ANA Patterns. [Updated: 2019; Accessed: Mar 2021]

Santos WFS, Cantuária APC, Félix DC, Guimarães NC, de Melo ICS. Complex patterns on HEp-2 indirect immunofluorescence assay in a large sample referred for anti-cell autoantibodies detection. Front Immunol. 2024 Jan.

Ткаченко О.Ю., Лапин С.В., Мазинг А.В., Тотолян А.А. Русскоязычная адаптация международной номенклатуры типов свечения ядра и цитоплазмы клетки (ICAP) для стандартизации выявления антинуклеарного фактора // Медицинская иммунология, 2020. Т. 22, № 6. С. 1195-1214.

Лапин С.В., Тотолян А.А. Антинуклеарные антитела: лабораторные тесты и диагностическое значение // Медицинская иммунология, 2001. Т. 3, № 1. С. 35-50.

Лапин С. В., Тотолян А.А. Иммунологическая лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний / — Санкт-Петербург.— Человек 2010.—.272 p.

Автоматизированный анализ антинуклеарных антител методом непрямой реакции иммунофлюоресценции с использованием HEp-2-клеток / Е. Н. Александрова, Ж. Г. Верижникова, А. А. Новиков [и др.] // Клиническая лабораторная диагностика. – 2015. – Т. 60. – № 3. – С. 30–35.

29263 просмотра