Электрофорез гемоглобина для диагностики гемоглобинопатий

Высокоинформативное исследование позволяет визуализировать и количественно определить процентное соотношение нормальных и аномальных фракций гемоглобина, что актуально в диагностике наследственных гемоглобинопатий. Это обширная группа заболеваний, включающая:

• Структурные, которые характеризуются заменой одной аминокислоты в цепи глобина, что приводит к появлению аномального гемоглобина с измененными свойствами (HbS, HbC, HbE, HbD и др.). Наибольшее клиническое значение представляет HbS-вариант, который приводит к серповидно-клеточной анемии.
• Талассемии - характеризуются нарушениями синтеза одной из цепей глобина (α, β, δ, γ), что приводит к дисбалансу цепей, гемолизу и неэффективному эритропоэзу. Проявления талессемии, в зависимости от числа дефектов, могут быть минимальными, выраженными умеренно или тяжёлыми и приводить к внутриутробной гибели плода.

В крови здорового взрослого присутствуют следующие виды гемоглобина:

• HbA (α₂β₂) — основная постнатальная форма, обеспечивающая газообмен (96-98%).
• HbA₂ (α₂δ₂) — минорный взрослый гемоглобин (2,0-3,2%). Его количественное определение критически важно для диагностики β-талассемии.
• HbF (α₂γ₂) — фетальный гемоглобин (<1-2%). После 6-12 месяцев жизни его уровень значительно снижается. Персистенция повышенного уровня у взрослых — важный диагностический признак.

Электрофорез в щелочном геле позволяет разделить эти фракции по заряду и выявить наличие аномальных вариантов, таких как HbS, HbC, HbE и другие. При получении положительного результата обязательным шагом является молекулярно-генетическое подтверждение предположительного диагноза путем исследования гена HBB.

Достоверность теста при постановке диагноза

Тест обладает высокой достоверностью при скрининге β-талассемий, вариантов, приводящих к серповидно-клеточной анемии и синдромов персистенции фетального гемоглобина. При использовании данного метода может быть затруднена индентификация α+/-талассемии (талассемия с одним патогенным вариантов).

Специальной подготовки не требуется.

• Диагностика бета-талассемии;
• Диагностика альфа-талассемии;
• Диагностика гемоглобинопатий;
• Диагностика серповидно-клеточной анемии;
• Дифференциальная диагностика микроцитарной гипохромной анемии;.
• Наличие патологических форм эритроцитов (мишеневидные эритроциты).

Гемоглобин А

• Норма: уровень HbA в пределах нормальных значений значительно снижает вероятность гемоглобинопатии.
• Патология (снижение): снижение фракции HbA может указывать на некоторое варианты гемоглобинопатий: α- и β-талассемии, умеренная или гетерозиготная персистенция HbF, гетерозиготное сочетание с аномальным гемоглобином и т.п. Уменьшение фракции HbA является физиологическим в младенческом возрасте (до 6 мес).
• Патология (отсутствие): отсутствие фракции HbA характерно для некоторых форм гемоглобинопатии (гомозиготная персистенция фетального гемоглобина, гомозиготное или гетерозиготное сочетание двух патологических форм гемоглобина и др.).

Гемоглобин А2

• Норма: уровень HbA2 в пределах нормы с большой вероятностью исключает наличие двух распространённых патологических вариантов гемоглобина: HbE и HbC.
• Патология (повышение до 25%): может наблюдаться при разных клинических состояниях: дефицит железа/витамина B12/фолиевой кислоты, β-талассемии, δ-талассемии, гомозиготное или гетерозиготное сочетание двух патологических форм гемоглобина (HbA отсутствует) и др.
• Патология (повышение более 25%): может наблюдаться при дефиците железа/витамина B12/фолиевой кислоты, β-талассемии, δ-талассемии, гомозиготном или гетерозиготном сочетании двух патологических форм гемоглобина и др.

Гемоглобин F

• Норма: с большой вероятностью исключает наследственную персистенцию фетального гемоглобина и уменьшает клиническую вероятность β-талассемии.
• Патология: во взрослом возрасте небольшое повышение HbF (<5%) может наблюдаться при умеренной наследственной персистенции HbF, а также диабете, гипертиреозе, дизэритропоэзе, анемическом шоке или у пациентов, получающих химиотреапию. Повышение HbF в пределах 5-35% у взрослого встречается при гетерозиготной βγ-талассемии и гетерозиготной наследственной персистенции HbF. Значительное повышение HbF (35-100%) является физиологическим для новорожденного, у взрослого может наблюдаться при следующих заболеваниях: гомозиготная наследственная персистенция HbF, гомозиготная βγ-талассемия, большая или промежуточная β-талассемия, смешанная гетерозиготная наследственная персистенция HbF/β –талассемия, смешанная гетерозиготная β -талассемия/βγ-талассемия.

Гемоглобин S/D

• Норма: уменьшает клиническую вероятность серповидно-клеточной анемии.
• Патология: наблюдается при наличии одной из двух дополнительных форм гемоглобина, которые увеличивают клиническую вероятность серповидно-клеточной анемии.

Варианты HbS и HbD невозможно отличить друг от друга при электрофорезе в щелочном геле, для уточнения диагноза рекомендовано выполнение электрофореза гемоглобина в кислом геле или изоэлектрофокусирование гемоглобина. Гомозиготное носительство HbS (HbS>50%, HbA отсутствует) приводит к серповидно-клеточной анемии, клинические проявления которой включают астено-вегетативные симптомы, суставной синдром, рецидивидующие бактериальные инфекции, тромбозы и трофические нарушения. HbD является редким вариантом гемоглобина, который в сочетании с β-талассемией или HbS может приводить к серповидно-клеточной анемии.