Это современное молекулярно-генетическое исследование, применяемое при диагностике миелопролиферативных заболеваний крови. К ним относится группа хронических состояний, при которых в костном мозге происходит избыточное образование клеток крови вследствие нарушений регуляции кроветворения на уровне стволовых клеток.

Ключевую роль в этих процессах играет ген JAK2, который участвует в передаче сигналов, контролирующих рост и деление клеток крови. При нормальной работе этот механизм строго регулируется, однако при генетических нарушениях JAK2 становится постоянно активным, что приводит к неконтролируемой пролиферации клеток. Наиболее распространённым изменением является мутация JAK2 V617F, но существуют и другие варианты нарушений, включая делеции и вставки в 12-м экзоне гена JAK2.

Истинная полицитемия – одно из миелопролиферативных заболеваний, для диагностики которого используются критерии Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ). Согласно этим критериям, учитываются стойкое повышение уровня гемоглобина или гематокрита (либо увеличение массы эритроцитов), характерные изменения костного мозга и наличие мутации JAK2 V617F. Именно эта мутация указана в основных диагностических критериях ВОЗ.

В то же время исследование 12-го экзона JAK2 имеет важное дополнительное значение. Делеции в этой области представляют собой утрату фрагментов ДНК, что приводит к изменению структуры белка и его постоянной активации. Такие изменения чаще встречаются у пациентов с клиническими признаками истинной полицитемии, но без выявляемой мутации JAK2 V617F.

Количественный анализ делеций в 12-м экзоне гена JAK2 позволяет обнаружить даже минимальное количество изменённых клеток и определить их долю среди всех клеток крови. Исследование проводится высокочувствительными молекулярными методами и расширяет диагностические возможности, дополняя стандартные подходы и углубляя понимание молекулярных механизмов миелопролиферативных заболеваний.

Показания для анализа

• Клинические и лабораторные признаки истинной полицитемии при отсутствии мутации JAK2 V617F;
• Стойкое повышение уровня гемоглобина, гематокрита или эритроцитов неясного происхождения;
• Подозрение на миелопролиферативное заболевание при нетипичной клинической картине;
• Дифференциальная диагностика причин эритроцитоза;
• Уточнение молекулярного профиля миелопролиферативного заболевания при отрицательных результатах стандартного молекулярного скрининга;
• Необходимость выявления клональных нарушений кроветворения с использованием высокочувствительных методов;
• Расширенное молекулярно-генетическое обследование при подозрении на истинную полицитемию.

Подготовка к исследованию определение делеций в 12 экзоне гена JAK2

Специальной подготовки к анализу не требуется.

Нормы и расшифровка результатов определение делеций в 12 экзоне гена JAK2

Интерпретация результатов данного исследования во многом зависит от клинической ситуации и времени, когда был взят биологический материал. Выявление делеций или других мутационных изменений в 12-м экзоне гена JAK2 свидетельствует о наличии клонального нарушения кроветворения и подтверждает присутствие миелопролиферативного заболевания. Такой результат указывает на то, что часть клеток крови содержит генетическое изменение, связанное с патологической активацией сигнальных путей роста.

Если анализ проводится на этапе противоопухолевой терапии, в том числе в ходе химиотерапии, положительный результат означает сохранение остаточного опухолевого клона клеток, несмотря на проводимое лечение. Это говорит о том, что не все изменённые клетки были устранены.

Отрицательный результат в процессе или после терапии указывает на отсутствие выявляемых мутантных клеток на момент исследования и соответствует состоянию ремиссии. В случае если ранее мутация определялась, а затем вновь обнаруживается при контрольном исследовании в отсутствии симптомов, это расценивается как признак возобновления клональной активности и возможного рецидива заболевания.

При каких заболеваниях чаще всего выявляют делеции в экзоне 12 JAK2?

Делеции и другие мутационные изменения в 12-м экзоне гена JAK2 чаще всего выявляются при истинной полицитемии – хроническом миелопролиферативном заболевании, сопровождающемся избыточным образованием эритроцитов. Такие нарушения характерны преимущественно для пациентов с клинической картиной истинной полицитемии, у которых не обнаруживается распространённая мутация JAK2 V617F. Реже изменения в 12-м экзоне JAK2 могут встречаться при других миелопролиферативных заболеваниях, однако их основное диагностическое значение связано именно с истинной полицитемией.

Почему количественный анализ может быть более информативным, чем качественный?

Количественный анализ на 12 экзон гена JAK2 позволяет определить не только сам факт наличия генетического изменения, но и его уровень – то есть долю клеток, содержащих мутацию. Качественный метод отвечает лишь на вопрос «обнаружено / не обнаружено», тогда как количественный анализ показывает степень вовлечённости кроветворения в патологический процесс.

Это особенно важно при миелопролиферативных заболеваниях, так как количество мутантных клеток отражает размер патологического клона и его динамику со временем. Количественный подход позволяет отслеживать изменения мутационной нагрузки на фоне терапии, выявлять минимальную остаточную болезнь и своевременно фиксировать признаки рецидива ещё до появления клинических проявлений.

Можно ли обнаружить эти делеции на ранних стадиях миелопролиферативных заболеваний?

Современные высокочувствительные молекулярно-генетические методы позволяют обнаруживать даже небольшую долю изменённых клеток на фоне преобладающего количества нормальных. На ранних этапах заболевания патологический клон может быть представлен минимальным числом клеток и не сопровождаться выраженными клиническими проявлениями. Количественный анализ делает возможным фиксацию таких начальных клональных изменений ещё до развернутой картины болезни, что особенно важно при подозрении на истинную полицитемию без мутации JAK2 V617F.

Как результат теста влияет на выбор терапии и прогноз?

Выявление делеций подтверждает клональную природу процесса и принадлежность заболевания к группе миелопролиферативных, что позволяет врачу более точно оценить биологические особенности болезни.

Количественные данные о доле клеток с мутацией дают представление о размере патологического клона и его активности. Это помогает оценивать динамику заболевания, эффективность проводимой терапии и глубину ответа на лечение. Снижение или исчезновение мутантного клона ассоциируется с благоприятным течением и устойчивой ремиссией, тогда как сохранение или повторное появление мутации может указывать на риск прогрессирования или рецидива.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абдулкадыров К. М., Шуваев В. А., Мартынкевич И. С. Что нам известно об истинной полицитемии (обзор литературы и собственные данные). Онкогематология, 2015; 3(10): 28-42.
2. Scott LM. The JAK2 exon 12 mutations: a comprehensive review. Am J Hematol. 2011 Aug;86(8):668-76.
3. Kralovics R, Passamonti F, Buser AS, et al. A gain‐of‐function mutation of JAK2 in myeloproliferative disorders. N Engl J Med 2005; 352: 1779 – 1790.
4. Субботина Т. Н., Маслюкова И. Е., Семащенко К. С., Ходос Г. А., Курочкин Д. В., Шалёва А. А., Михалёв М. А., Васильев Е. В., Осадчая М. Г., Дунаева Е. А., Есьман А. С., Миронов К. О. АНАЛИЗ СОМАТИЧЕСКИХ МУТАЦИЙ В ГЕНАХ JAK2, CALR, MPL И ASXL1 И ОЦЕНКА ИХ ВЛИЯНИЯ НА ВЫЖИВАЕМОСТЬ ПАЦИЕНТОВ С МИЕЛОФИБРОЗОМ // ОГ. 2023. №1.
5. Лебедев Т.Д., Спирин П.В., Орлова Н.Н., Прокофьева М.М., Прасолов В.С. (2015) Сравнительный анализ экспрессии генов ‒ мишеней противоопухолевой терапии, в клеточных линиях нейробластомы. Молекуляр. биология. 49, 1052‒1055.
6. Baxter EJ, Scott LM, Campbell PJ, et al. Acquired mutation of the tyrosine kinase JAK2 in human myeloproliferative disorders. Lancet. 2005;365(9464):1054-1061