Исследование выявляет специфические мутации в гене KRAS в ДНК раковых клеток и тканей. KRAS – это сокращенное название гена Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog. Он входит в группу генов, участвующих в сигнальном пути, называемом путем рецептора эпидермального фактора роста (EGFR). Этот сложный сигнальный путь включает в себя множество компонентов, которые передают сигналы извне внутрь клетки, помогая регулировать рост, деление, выживание и гибель клеток.

Во многих нормальных клетках связывание эпидермального фактора роста (EGF) с его рецептором (EGFR) на поверхности клетки является важным сигналом для роста и деления клеток. Другие сигналы в этом сигнальном пути включают класс белков, называемых ферментами тирозинкиназы (TK), и белок, продуцируемый геном KRAS. В норме компоненты этого пути взаимодействуют в регуляции роста и деления клеток и не стимулируют пролиферацию клеток по отдельности.

Однако при некоторых видах рака EGFR активируется даже в отсутствие EGF, что приводит к неконтролируемому росту и делению клеток. Препараты, ингибирующие EGFR или ферменты тирозинкиназы, часто оказываются эффективными при лечении таких видов рака. Однако иногда наблюдается мутация в гене KRAS, приводящая к образованию аномального белка K-Ras. Он всегда активен и может стимулировать рост клеток даже в отсутствие сигналов от EGFR или других белков тирозинкиназы. При таких видах рака препараты, ингибирующие EGFR или тирозинкиназы, не будут эффективны. Многочисленные исследования показали, что активирующие мутации KRAS тесно связаны с резистентностью к анти-EGFR-терапии.

Мутации в гене KRAS обнаруживаются в 15–20% случаев рака у человека, в основном при раке поджелудочной железы, раке толстой кишки и раке легких, а также при лейкемии. Приблизительно 30–40% случаев рака толстой кишки и 15–30% случаев рака легких имеют мутации KRAS. В настоящее время для лечения рака толстой кишки и немелкоклеточного рака легких используются препараты, нацеленные на EGFR. Тестирование на мутации KRAS используется для определения эффективности этих препаратов в лечении данных видов рака.

Показания для анализа KRAS мутация

Анализ на мутации в гене KRAS (кодоны 12, 13, 61, 117 и 146) назначают в онкологической практике для уточнения молекулярных особенностей опухоли и выбора оптимальной тактики лечения. Исследование показано пациентам с подтверждённым или предполагаемым колоректальным раком, а также при некоторых других злокачественных новообразованиях, где статус KRAS имеет прогностическое и предиктивное значение.

Тест проводят перед назначением таргетной терапии, особенно препаратов, воздействующих на рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), поскольку наличие мутаций KRAS может снижать эффективность такого лечения. Анализ также применяют при планировании лекарственной терапии, оценке возможных вариантов лечения и уточнении прогноза заболевания. Интерпретация результата осуществляется врачом с учётом клинической картины и данных других исследований.

Обычно анализ на мутации в гене KRAS проводится на опухолевой ткани, удаленной у пациента во время предыдущей операции или биопсии. Как правило, тестирование KRAS проводят пациентам с опухолями высокой стадии, требующими адъювантной терапии.

Подготовка к исследованию

Специальной подготовки к исследованию на мутации гена KRAS, как правило, не требуется. Анализ выполняют на опухолевой ткани или другом биологическом материале, полученном в ходе биопсии или операции.

Что показывает анализ?

Этот тест выявляет наличие наиболее распространенных мутаций гена KRAS в ДНК клеток опухолевой ткани, что помогает определить оптимальное лечение рака. Анализ мутаций KRAS назначается в первую очередь для определения вероятности ответа вашего метастатического рака толстой кишки или немелкоклеточного рака легких на стандартную терапию, в частности, на терапию препаратами, блокирующими EGFR.

Нормы и расшифровка результатов

Для гена KRAS понятие «нормы» отличается от стандартных лабораторных показателей и основано на выявлении или отсутствии мутаций. В норме в исследуемом материале определяется дикий тип KRAS, то есть отсутствие мутаций в анализируемых кодонах 12, 13, 61, 117 и 146. Такой результат указывает на сохранённую структуру гена.

Отрицательный результат (мутации не выявлены) означает, что в образце обнаружен «дикий» тип KRAS. В клинической практике это расценивается как потенциальная чувствительность опухоли к препаратам, воздействующим на рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), при наличии соответствующих показаний. Однако сам по себе этот результат не определяет тактику лечения и оценивается в комплексе с клиническими данными.

Положительный результат (выявлена мутация KRAS) указывает на наличие генетических изменений в одном из исследуемых кодонов. Такой вариант, как правило, ассоциирован с отсутствием эффекта от терапии ингибиторами EGFR и влияет на выбор лекарственных схем, особенно при распространённых формах заболевания. Тип мутации имеет значение: отдельные варианты, например, KRAS G12C, могут открывать возможность применения современных таргетных препаратов или участия в клинических исследованиях.

Интерпретация исследования

Если в тканях ракового образования обнаружена мутация KRAS, то таргетная терапия окажется неэффективной. Наличие мутации KRAS также указывает на, вероятно, худший прогноз, хотя наличие конкретной мутации не может предсказать, насколько тяжелым или агрессивным будет рак.

Отрицательный результат теста на KRAS указывает на то, что рак может реагировать на терапию анти-EGFR препаратами, но отсутствие мутации KRAS, выявленное с помощью теста, не гарантирует этого. Отрицательный результат теста может быть получен, если образца опухолевой ткани недостаточно или если некоторые раковые клетки в опухоли содержат мутацию, а другие – нет. Кроме того, некоторые мутации KRAS могут не обнаруживаться тестами из-за их специфического расположения в ДНК. Другие факторы также могут привести к развитию рака, устойчивого к анти-EGFR препаратам.

Что может повлиять на результаты?

На результаты теста на мутации гена KRAS могут влиять несколько факторов, связанных как с биологическими особенностями опухоли, так и с техническими аспектами исследования. Важное значение имеет качество и тип образца: при недостаточном количестве опухолевых клеток или выраженном некрозе вероятность ложноотрицательного результата возрастает.

Существенную роль играет гетерогенность опухоли – разные участки новообразования могут иметь различный мутационный профиль, поэтому результат зависит от зоны, из которой был получен материал.

Что делать при отклонениях от нормы

Мутация KRAS – лишь один из факторов, характеризующих опухолевый процесс. Она действительно может влиять на выбор лекарственной терапии, однако оценивать её следует только в совокупности с другими клинически значимыми параметрами. На практике нередко более важное значение имеют стадия заболевания на момент диагностики, локализация метастазов и чувствительность опухоли к химиотерапии, чем сам вариант мутации KRAS.

Статус KRAS имеет принципиальное значение при планировании лечения преимущественно на IV стадии заболевания. В этом случае наличие мутации, как правило, исключает применение ингибиторов EGFR, хотя существуют клинические нюансы, которые врач учитывает индивидуально.

Термин «трудноподдающаяся лечению» в отношении мутаций KRAS не означает неэффективность стандартных методов терапии. Речь идёт о сложности прямого таргетного воздействия на саму мутацию. При этом исследования в этой области активно продолжаются, и для отдельных вариантов, в том числе KRAS G12C, уже доступны новые одобренные препараты и клинические исследования.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Лактионов К.К., Артамонова Е.В., Бредер В.В., Горбунова В.А., Моисеенко Ф.В., Реутова Е.В. и соавт. Практические рекомендации по лекарственному лечению немелкоклеточного рака легкого. Злокачественные опухоли : Практические рекомендации RUSSCO #3s2, 2019 (том 9). С. 32–48.
2. Tan C, Du X. KRAS mutation testing in metastatic colorectal cancer. World J Gastroenterol. 2012 Oct 7;18(37):5171-80.
3. Schwarzenbach H, Hoon DS, Pantel K. Cell-free nucleic acids as biomarkers in cancer patients. Nat Rev Cancer. 2011;11(6):426-437.
4. Писарева Е.Е., Любченко Л.Н., Коваленко С.П., Шаманин В.А. АНАЛИЗ МУТАЦИЙ В ГЕНАХ KRAS И BRAF ПРИ РАКЕ ТОЛСТОЙ И ПРЯМОЙ КИШКИ В РОССИЙСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ. Сибирский онкологический журнал. 2016;15(2):36-41.
5. Kriegsmann M. Detection of KRAS, NRAS and BRAF by mass spectrometry - a sensitive, reliable, fast and cost-effective technique / M. Kriegsmann, N. Arens, V. Endris [et al.] // Diagn Pathol. — 2015. — No. 10. — p.132.